如何选择抗体
发布网友
发布时间:2022-04-19 09:43
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热心网友
时间:2022-05-18 10:04
抗体的选择
作为western来讲,理论上单抗比多抗的特异性要好,但单抗种类较少一般价格偏高,所以一般来说多抗足够了。用于western的抗体和用于ELISA的抗体,一 般来说用于western的抗体识别的是氨基酸序列特异性;而可用于ELISA的抗体则要看抗原种类,有些是识别氨基酸序列特异性,有些是识别构像特异性。所以一-般根据抗体说明书来确定。
做免疫印迹时选择抗体主要应考虑两个问题,一是所选抗体是否能识别凝胶电泳后转印至膜上的变性蛋白,另一个是所选抗体是否会引起交叉反应条带。
觉得单抗和多抗价格上差异与其处理方式有很大关系,可以仔细咨询一下销售 商。
热心网友
时间:2022-05-18 10:04
1. 一抗选择
(1)确定抗体的名字,注意中英文名字、别名、亚型等信息。
(2)确定您的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,或者是FACS。每种抗体说明书都会列出抗体经验证过适用的实验类型,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证。
(3)确定实验样本的种属,Human,Mouse,Rat等。我们的抗体说明书都列出该抗体验证过的适用物种,可根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。
(4)样本抗原蛋白的结构性质。了解样本抗原蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性,蛋白空间构象的改变,会影响抗体的免疫亲和反应。
(5)单多克隆抗体的选择。一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。
2. 二抗选择
(1)种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、Cy3、PE等。
热心网友
时间:2022-05-18 10:05
如何选择抗体
首先要分析试验的应用类型,一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,比如可以应用于WB,IHC,ICC 或者是 ELASA 分析等
其次是分析样本蛋白的结构性质,看待测样本蛋白的结构域以及提取或处理过程等
最后就是具体看样品的种属,抗体宿主的种类,荧光和化学发光标记等等
热心网友
时间:2022-05-18 10:05
如何选择抗体具体的要根据设计的实验要求来,根据自己实验需求来选择,可以去专业的抗*备公司咨询一下,如:ABCam、abclonal、Santa等等。
热心网友
时间:2022-05-18 10:06
做实验